一、設(shè)備和材料

1）biocomma^® CommaMix 多功能混勻儀
2）Copure^® PRP 磷脂去除柱
3) Copure^® PPT 蛋白沉淀過濾板

二且预、儀器條件

儀器：FH-6000MD UPLC-MS/MS
色譜柱：Hypersil Gol.D aQ (2.1mm×100 mm, 1.9 μm)
柱溫：35 ℃
樣品溫度：10 ℃
進樣量：5 μL
流動相：A：Buffer A B：Buffer B
洗脫方式：梯度洗脫

表 1 流動相梯度洗脫條件

離子化方式：ESI+ 電噴霧電壓：3500 V
鞘氣壓力：40 arb 輔氣壓力：2 arb
離子傳輸管：350 ℃ 輔氣溫度：320 ℃
采集方式：Precursor Ion Scan ( 子離子 184 m/z槽袄，母
離子范圍 184~1000 m/z)

三、實驗步驟

1锋谐、樣品提取
1） 將 Copure^® PPT 96 蛋白沉淀過濾板置于 96 孔收集板上遍尺，加入 400 μL 沉淀劑截酷。
2） 將 100 μL 血清樣本分裝加入到 96 孔蛋白沉淀過濾板各孔中。
3） 將蛋白沉淀板上端各孔封膜后乾戏，置于多功能混勻儀上迂苛，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速到 2000 rpm，充分混合 2 min鼓择，然后靜置10 min画了，待蛋白沉淀完全。
4） 3000 rpm離心2 min吼季，收集過濾液到96孔收集板中嫌或，待凈化。
2误反、樣品凈化
1）活化： 向Copure^® PRP及各品牌去磷脂產(chǎn)品（規(guī)格均為 60 mg/1 mL）中加 2 mL 甲醇喝灌，棄去流出液。
2）凈化： 取上述樣品提取步驟奠钾，經(jīng)過血清蛋白沉淀過濾后的收集液嘉栽，過磷脂去除產(chǎn)品，收集流出液浮两，過 0.22 μm 有機濾膜损螃，上機分析。

四俩食、實驗結(jié)果

表 2 不同品牌的磷脂去除產(chǎn)品對比效果

結(jié)論：經(jīng)過 UPLC-MS/MS 檢測分析筹聂，逗點生物磷脂去除產(chǎn)品與市面類似產(chǎn)品的磷脂去除效果相當(dāng)，均可滿足測試要求菊碟。

五节芥、訂購信息